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Q-瓊脂糖凝膠HP

產(chǎn)品簡介

Q-瓊脂糖凝膠HP是將季銨基團鍵合在瓊脂糖微球上形成的一種強陰離子交換介質(zhì)。具有高分辨率,高載量,回收率高和再生能力強等特點。化學穩(wěn)定性好,可用氫氧化鈉在位清洗。基質(zhì)的親水特性保證在洗脫過程中減少細胞衍生雜質(zhì)的非特異性吸附??捎糜诘鞍踪|(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。 Q-瓊脂糖凝膠HP

產(chǎn)品型號:S9200
更新時間:2025-08-22
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:286
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產(chǎn)品簡介
Q-瓊脂糖凝膠HP是將季銨基團鍵合在瓊脂糖微球上形成的一種強陰離子交換介質(zhì)。具有高分辨率,高載量,回收率高和再生能力強等特點?;瘜W穩(wěn)定性好,可用氫氧化鈉在位清洗。基質(zhì)的親水特性保證在洗脫過程中減少細胞衍生雜質(zhì)的非特異性吸附。可用于蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
產(chǎn)品參數(shù)
產(chǎn)品名稱:Q-瓊脂糖凝膠HP (Q- Sepharose  High Performance)
貨號:S9200
基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基:季銨
交換基團:- N+(CH3)3
離子容量:0.14-0.20 mmolCl-/mL
顆粒大?。?4μm
蛋白載量:10mg lgG,24mg HAS/mL
工作pH:1~14(短時間 ,在位清洗);2~12(長時間)
化學穩(wěn)定性:在以下溶液中穩(wěn)定- 1mol/L NaOH;8mol/L尿素;6mol/L鹽酸胍;30%異丙醇;70%乙醇;30%SDS,30%乙腈;
使用方法
1. 裝柱
(1)       將所有的試劑和填料達到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
(2)       根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量,清洗掉20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1比例)配成勻漿。
(3)       將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液體(液面略高于濾膜),務必使底端無氣泡。
(4)       用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意不要使用氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)       打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2.平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子,到流出液電導和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液,如:Tris、PBS等。
3. 上樣
(1)  樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心、過濾后上柱;
(2)  一般情況是讓目標產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡洗液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標產(chǎn)品。
(3)  介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動相的離子強度和pH值。鹽濃度越小,介質(zhì)對組分吸附越牢。
4.  洗脫
Q瓊脂糖凝膠介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5. 再生
一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積,接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6.在位清洗
(1) 對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M  NaCl去除。
(2)對沉淀蛋白、以疏水作用結(jié)合的蛋白或者脂類物質(zhì),可用1M NaOH去除。
(3)對強疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,可用4-10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍柱體積緩沖液平衡柱子。
7. 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5-6小時或者用0.1M的氫氧化鈉24小時?;蛴靡韵虏襟E去除:
(1) 2倍柱體積的70%的乙醇;
(2)  2倍柱體積50Mm Tris-HcL Ph7.5
(3) 1倍柱體積4M尿素
(4) 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M  NaCl;
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
8. 消毒
用0.5-1.0 M NaOH 室溫下洗8-10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
注意事項
(1)  密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇),通風、干燥的地方,不能冷凍。用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。
(2)  在裝柱、使用和保存柱子的時候,要避免柱子流干,氣泡進入。

  備注:產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級。請以實際標簽信息為準。
 


 


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