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當前位置:首頁產(chǎn)品中心細胞生物學中性粒細胞分離系列P9204小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒
小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒

產(chǎn)品簡介

是一種用于從小鼠外周血中分離中性粒細胞的試劑盒,其主要組成包括試劑A、試劑B、鼠紅細胞沉降液、紅細胞裂解液和細胞洗滌液等。 小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒

產(chǎn)品型號:P9204
更新時間:2025-08-09
廠商性質:生產(chǎn)廠家
訪問量:1285
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產(chǎn)品簡介:

  同常規(guī)試劑盒相比,本試劑盒通過優(yōu)化分離液相關成分,進一步提高了小鼠外周血中性粒細胞的分離純度,更適用于流式細胞儀分選等下游實驗操作。

產(chǎn)品組成

試劑盒組分

規(guī)格

保存條件

試劑A

200mL

2~8℃

試劑B

100mL

2~8℃

鼠紅細胞沉降液

100mL

室溫

紅細胞裂解

100mL

室溫

細胞洗滌液

200mL

室溫

操作步驟(僅供參考)

1、 沉降去除紅細胞取新鮮抗凝血與血液稀釋液(注射用生理鹽水或1XPBS)及紅細胞沉降液按照1:1:1比例混勻,室溫下靜置30-40min后,可見紅細胞沉于試管底部,小心(富含細胞及血小板)用于后續(xù)細胞分離。 

2、 樣本分離15mL離心管中先加入4mLA,后將2mLB沿管壁緩慢疊加45°傾斜試管試劑A之上,形成梯度界面,沉降后上清小心平鋪于分面上方。注意分離液與樣本總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果。)

3、 室溫條件下水平轉子600-1000g25-30minutes(血液體積越大所需心力越大,離心時間越長,最佳分離條件需摸索,離心最大轉速不超過1000g)

4、 離心后,上層白膜層為單個核細胞層,下層白膜層為粒細胞層。

5、小心吸取粒細胞層至新的離心管中,加入10mL細胞洗滌液洗滌細胞。250g,離心10min(如有紅細胞污染可依據(jù)樣本體積加入適量紅細胞裂解液祛除污染)。

6、 棄上清,加入5mL細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min

7、 棄上清重懸細胞備用。

注意事項:

A.開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。

B.請根據(jù)實驗需要預先無菌分裝分離液試劑,并在其恢復至室溫(18℃~25℃后使用,如室內溫度較低,可將分離液預熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導致白膜層不清晰。

C.血液樣本最好為新鮮抗凝血(采血2h以內),為保持中性粒細胞的活性,應避免冷凍和冷藏。

D.稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含CaMg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導致血細胞凝集,大大降低細胞得率及純度。

E.部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導致細胞掛壁,影響分離效果。

F.血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會影響分離效果,可以調節(jié)離心轉數(shù)和離心時間,摸索最佳的分離條件。

G.如果要進一步對分離的細胞進行培養(yǎng),注意全程保持無菌操作,避免微生物污染。


小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒

小鼠外周血中性粒細胞分離(Plus)試劑盒

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