細(xì)胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅
 

貨號(hào)   規(guī)格      備注
T1300  100ml       不含酚紅
T1320  100ml       含酚紅

產(chǎn)品說明 ：
    在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA 等，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞外基質(zhì)）水解，使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。
    索萊寶生產(chǎn)的胰蛋白酶-EDTA 消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM），溶于無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液中，經(jīng)過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點(diǎn)。通常室溫消化 2 分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。胰蛋白酶-EDTA 消化液有含酚紅和不含酚紅 2 類產(chǎn)品，酚紅具有 pH 指示作用。
    保存：-20℃保存，有效期 12 個(gè)月。

使用方法 ：
1. 貼壁細(xì)胞的消化：
     a) 吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
     b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液，蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 1-2 分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。
     c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
     d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。
     e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化：
    不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
 

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影響因子:3.486 PMID:30858699

注意事項(xiàng) ：
    1．由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況，確定消化時(shí)間；消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況；
    2．本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過程中要特別注意無(wú)菌操作，避免消化液被微生物污染；
    3．不宜 4℃長(zhǎng)期保存，切忌反復(fù)凍融，小量使用時(shí)建議分裝凍存；
    4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

細(xì)胞培養(yǎng)試劑胰蛋白酶－EDTA消化液不含酚紅。