凋亡檢測(cè)試劑盒AnnexinV Alexa Fluor647/PI

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面，這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨酸（PS）從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外，使 PS 暴露在細(xì)胞膜外表面。PS 是一種帶負(fù)電荷的磷脂，正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面，在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對(duì)稱(chēng)性被破壞而使 PS 暴露在細(xì)胞膜外。Annexin V 具有易于結(jié)合到磷脂類(lèi)如 PS 的特性，對(duì) PS 有高度的親和性。因此，該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測(cè)暴露在細(xì)胞膜表面的 PS。PS 轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所*的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就破壞了。因此，可以采用 AnnexinV 與PI 雙染的方法，通過(guò)流式檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡。

操作步驟:
標(biāo)記的 Annexin V 可結(jié)合流式細(xì)胞儀用于檢測(cè)細(xì)胞外膜上的磷酯酰絲氨酸
1.用去離子水按 1:4 稀釋結(jié)合緩沖液（4ml 結(jié)合緩沖液+12ml 去離子水）；
2.用 4℃預(yù)冷的 PBS 洗細(xì)胞兩次，用 250ul 結(jié)合緩沖液重新懸浮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其濃度為 1× 106/ml；
3.取 100µl 的細(xì)胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5µl Annexin V/Alexa Fluor 647 和 10µl 20ug/ml的碘化丙錠溶液；
4. 混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘；
5. 在反應(yīng)管中加 400µl PBS，流式細(xì)胞儀（FACS）分析

 相關(guān)文獻(xiàn)：

《The establishment of clonally derived chicken embryonic fibroblast cell line (CSC) with high transfection efficiency and ability as a feeder cell》 作者:Ruifeng Zhao , Jing Jin , Xinyu Sun , Kai Jin , Man Wang , Mahmoud F. Ahmed , Qisheng Zuo , Yani Zhang ,Zhenhua Zhao , Guohong Chen , Bichun Li 期刊:Journal of cellular Biochemistry 影響因子:3.062 PMID:30076744
 

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