谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱:：谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Glutamic-pyruvic Transaminase（GPT）Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC1550              產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣           產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：130
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
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簡要介紹：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動物肝細胞GPT 活性很高，當肝細胞壞死，GPT 釋放到血液中，血清GPT 活性顯著增高。因此，GPT 被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測指標。
    GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙tong酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm 讀取吸光值并計算酶活力。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：30mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體8mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體8 mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：液體80mL×1瓶，4℃保存；
標準品：液體1mL×1支，20μmol/mL丙tong酸鈉標準品，4℃保存。
產(chǎn)品說明：
GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動物肝細胞GPT活性很高，當肝細胞壞死，GPT釋放到血液中，血清GPT活性顯著增高。因此，GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測指標。
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙tong酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基ben肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙tong酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計算酶活力。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品測定的準備
1、細胞或微生物樣品的制備：
先收集細胞或微生物樣品到離心管內(nèi)，棄上清，按照每500萬細胞或微生物加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率20％，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）。3500g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：
稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進冰浴行勻漿。3500g  4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣品：直接檢測。
二、測定操作表：

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長505nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標準曲線的測定

先將標準品稀釋2μmol/mL，按下表混合標準品和試劑一得到濃度梯度標準管：
 

1. 在EP管中加入下列試劑

注:0μmol/mL 標準管為空白管。
三、計算

1. 標準曲線的繪制：

以各標準溶液濃度為x軸，以?A（A標準管-A空白管）為y軸做標準曲線，得到方程y=kx+b。將（A測定管-A對照管）帶入方程求x值。

1. GPT活性計算：

（1）按樣本鮮重計算：
單位定義：每小時每g鮮重樣品催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個GPT活力單位。
GPT（U/g鮮重）=x×（V樣本+V試劑一）÷（W×V樣本÷V樣總）÷T=12x÷W。
（2）按樣本蛋白濃度計算：
單位定義：每小時每mg組織蛋白催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個GPT活力單位。
GPT（U/mg prot）=x×（V樣本+V試劑一）÷（Cpr×V樣本）÷T=12x÷Cpr。
（2）按血清體積計算：
單位定義：每小時每mL血清樣品催化產(chǎn)生1μmol丙tong酸的量為一個GPT活力單位。
GPT（U/mL）=x×（V樣本+V試劑一）÷V樣本÷T=12x。
V樣本：樣本體積，0.02mL；V試劑一：試劑一體積，0.1mL；V樣總：提取液體積，1mL；W：樣本鮮重，g；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；T：反應(yīng)時間，0.5h。

相關(guān)文獻：
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu  期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影響因子:5.646 PMID:30373678