全蛋白提取試劑盒（中）用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為溫和，可快速獲得總蛋白，可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn)，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。

產(chǎn)品組成:

操作方法:

1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；
稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個(gè)過程注意冰上操作；
將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；
吸取上清至新的管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個(gè)細(xì)胞需要裂解液1ml；
貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液；在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞，
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細(xì)胞：4 oC 400g離心收集細(xì)胞，用冷的PBS洗兩次細(xì)胞，同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液，
渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復(fù)3-4次；
裂解完畢之后，將細(xì)胞裂解液4 oC 12000g離心30min；
將上清移入新的EP管中；
進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復(fù)凍融，避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)

注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)過程，所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融，保證操作過程中的低溫環(huán)境；
PSMF（有毒）現(xiàn)用現(xiàn)加，因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解；

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標(biāo)題:Inhibitory effect of Portulaca oleracea L. aqueous extract and juice on NLRP3 inflammasome activation in an ulcerative colitis mouse model

成員:Fan Yi-meng, Wei Yuan-yuan, Wang Hui-ru, Yu-Ga, Zhang Yan-nan, Hao Zhihui

論文因子:5.8 發(fā)表期刊:ENVIRONMENTAL SCIENCE AND POLLUTION RESEARCH pmid:37402916

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標(biāo)題:Panax notoginseng saponin alleviates pulmonary fibrosis in rats by modulating the renin-angiotensin system

成員:Han Li, Yu-guang Wang, Teng-fei Chen, Yun-hang Gao, Ling Song, Yi-fei Yang, Yue Gao, Wang Huo, Guang-ping Zhang

論文因子:5.4 發(fā)表期刊:JOURNAL OF ETHNOPHARMACOLOGY pmid:37532070

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標(biāo)題:LncDGAT2 is a novel positive regulator of the goat adipocyte thermogenic gene program

成員:Xin Liu, Chunhua Huang, Tingting Jiang, Xueliang Sun, Siyuan Zhan, Tao Zhong, Jiazhong Guo, Dinghui Dai, Yan Wang, Li Li, Hongping Zhang, Linjie Wang

論文因子:8.2 發(fā)表期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES pmid:37355065

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標(biāo)題:Activating Mitochondrial Sirtuin 3> in Chondrocytes Alleviates Aging-Induced Fibrocartilage Layer Degeneration and Promotes Healing of Degenerative Rotator Cuff Injury

成員:Shanshan Xie, Changbiao Guan, Tingmo Huang, Guang Yang, Jianzhong Hu, Deyi Sun, Hongbin Lu

論文因子:5.77 發(fā)表期刊:AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY pmid:37068637

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注意：以上文獻(xiàn) 僅供參考

全蛋白提取試劑盒(中)

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