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ELISA實驗樣本的選擇—血清&血漿

更新時間:2023-01-29點擊次數:1821

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很多小伙伴在準備采血做ELISA的時候都會有這樣的疑問—我檢測的指標是用血清,還是血漿好?今天小編就來帶大家了解一下ELISA檢測使用血清和血漿的差異。


血清和血漿的區(qū)別


人的血液由血漿和血細胞組成。血漿的成分主要包含水、蛋白質、葡萄糖、無機鹽。血細胞包含紅細胞、白細胞、血小板。

1

血液中如果加入抗凝劑,所獲得的不含血細胞成分的液體,即血漿。血漿中不含一些凝血過程中血小板釋放的物質。

2

若血液中不加抗凝劑,則血小板釋放的凝血物質會和血漿中的凝血素以及纖維蛋白原結合形成纖維蛋白,纖維蛋白很快地凝固形成凝血kuai,經血凝塊聚縮釋出的液體,即血清。血清中不含纖維蛋白原和某些凝血因子、無參與凝血的血漿蛋白。

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在檢測中樣本的選擇


1、全血多用于血細胞、血常規(guī)、血沉等方面的檢測;

2、血清多用于血液生化、免疫等方面的檢測;

3、血漿多用于凝血等方面的檢測;

4、血清的凝血過程可能會與藥物產生吸附作用,從而減少血清的含量,造成實驗中的誤差;

5、血漿中含有抗凝物質(EDTA或肝素),可能干擾化合物的結合或檢測,如果要收集血漿,抗凝劑的種類應根據具體的實驗要求進行選擇。


血清&血漿樣本的制備方法


血清樣本的制備

1

使用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室溫下放置1小時或2~8℃過夜,分離出血清;

2

2~8℃條件下,以1000×g離心20分鐘,小心收集上清液(血清)。


血漿樣本的制備

1

使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本;

2

采集后30分鐘內,2-8℃條件下,以1000×g離心15分鐘,小心收集上清液(血漿);

3

常見的抗凝劑包括:EDTA鈉鹽,肝素鈉,枸櫞酸鈉等,ELISA實驗中,通常推薦EDTA鹽(EDTA二鈉鹽或EDTA二鉀鹽)作為抗凝劑。

檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書,查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求。


注意事項

在收集血液樣本的過程中應避免溶血,因為紅細胞在溶解時會釋放具有過氧化物酶活性的物質,這種情況下,ELISA實驗中將會出現非特異性顯色反應,導致檢測結果不準確。另外,樣本還應避免細菌污染,因為細菌可能含有內源性HRP,也會導致檢測結果不準確。


所有血清、血漿樣本收集完成后,應及時分裝放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復凍融。如果在24小時內檢測,樣本可以存放在2~8℃。在分析前,冷凍樣本應該緩慢的恢復至室溫,輕柔地混勻。如果保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

以上就是小編分享給大家關于ELISA檢測是用血清樣本還是血漿樣本的實驗干貨,祝各位小伙伴實驗順利!


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