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胰蛋白酶消化液使用說明

更新時間：2017-12-01點擊次數：1622
胰蛋白酶消化液使用說明
　　使用說明：
　　1.貼壁細胞的消化：
　　a)吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
　　b)加入少量胰蛋白酶-EDTA消化液，蓋過細胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同，對于貼壁牢固的細胞可適當延長消化時間。
　　c)顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
　　d)如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白酶-EDTA消化液重新消化。
　　e)如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。
　　2.組織的消化：
　　不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

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